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LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒

Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统，用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。该试剂盒包括用于设置和定制 DNA 结合反应的试剂、用于检测试剂盒系统的一组 DNA 和蛋白提取物、用于生物su标记 DNA 靶标的稳定链霉su亲和素-HRP 偶联物以及用于检测的一种极其灵敏的化学发光底物模块。

LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒的特点：

•非常适合检测细胞核提取物中的低丰度蛋白
• 灵敏度超过放射性和di高辛方法
• 与先前为常用 DNA-蛋白相互作用建立的结合条件兼容
• 包括 EBNA 控制系统以帮助新用户开发工作检测方法并了解用于确认结合相互作用特异性的方法

LightShift EMSA 检测的原理类似于 Western 印迹。生物su末端标记的双螺旋 DNA 与细胞核提取物或纯化因子一起孵育并在天然凝胶上电泳。然后快速（30 分钟）将 DNA 转印到阳性尼龙膜上，进行紫外交联，用链霉su亲和素-HRP 偶联物进行探测，并与底物一起孵育。可在一天内完成从标记到得出结果。

蛋白与 DNA 的相互作用是控制许多细胞过程的关键，包括 DNA 复制、重组和修复、转录和病毒组装。研究基因调控和确定蛋白:DNA 相互作用的核心技术是电泳迁移率实验 (EMSA)。

EMSA 技术基于以下观察结果：在进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时，蛋白:DNA 复合物的迁移速度比无 DNA 分子慢。因为 DNA 迁移率会根据蛋白结合率发生偏移或速度减慢，因此，该实验也被称为凝胶偏移或凝胶延迟实验。直至 EMSA 蛋白:DNA 相互作用主要通过硝酸纤维素过滤柱结合试验进行研究。

进行试验所需的全部是纯化的 DNA 靶标，该靶标已用生物su、待测蛋白提取物、尼龙膜和碱性电泳设备进行末端标记。DNA 靶标可以在合成时加上 5' 或 3' 生物su标记，或者在合成后使用 Thermo Scientific 生物su 3' 末端 DNA 标记试剂盒（产物编号 89818）进行标记。细胞核、细胞溶质或全细胞蛋白提取物可以通过多种方法获得，包括 Thermo Scientific NE-PER 核和细胞质提取试剂盒（产物编号 78833）。

LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒